TCCS 284 : 2015/BVTV - Thuốc bảo vệ thực vật chứa hoạt chất brassinolide - Yêu cầu kỹ thuật và phương pháp thử

T I Ê U  C H U Ẩ N  C Ơ  S Ở                                          TCCS 284 : 2015/BVTV

Thuốc bảo vệ thực vật chứa hoạt chất brassinolide - Yêu cầu kỹ thuật và phương pháp thử

Pesticides containing brassinolide –

Technical requirements and test methods

1    Phạm vi áp dụng

Tiêu chuẩn này quy định phương pháp thử đối với brassinolide kỹ thuật và các dạng thành phẩm thuốc bảo vệ thực vật có chứa hoạt chất brassinolide (xem Phụ lục A).

2    Tài liệu viện dẫn

Các tài liệu viện dẫn sau là rất cần thiết cho việc áp dụng tiêu chuẩn này. Đối với các tài liệu viện dẫn ghi năm công bố thì áp dụng phiên bản được nêu. Đối với tài liệu viện dẫn không ghi năm công bố thì áp dụng phiên bản mới nhất, bao gồm cả các sửa đổi (nếu có).

TCVN 4851 (ISO 3696), Nước dùng để phân tích trong phòng thí nghiệm – Yêu cầu kỹ thuật và phương pháp thử

TCVN 8050 : 2009, Nguyên liệu và thành phẩm thuốc bảo vệ thực vật – Phương pháp thử  tính chất lý hóa

TCVN 8143 : 2009, Thuốc bảo vệ thực vật – Xác định hàm lượng hoạt chất cypermethrin

TCVN 8382 : 2010, Thuốc bảo vệ thực vật chứa hoạt chất dimethoate – Yêu cầu kỹ thuật và phương pháp thử

TCCS 135:2014/BVTV, thuốc bảo vệ thực vật – Yêu cầu kỹ thuật

3   Yêu cầu kỹ thuật

3.1    Yêu cầu về hàm lượng hoạt chất

3.1.1 Thuốc kỹ thuật

Hàm lượng brassinolide (tính theo % w/w, g/kg) trong thuốc kỹ thuật phải được công bố không nhỏ hơn 98% và khi xác định, hàm lượng trung bình không  nhỏ hơn mức hàm lượng tối thiểu đã công bố.

3.1.2   Thuốc thành phẩm

Hàm lượng brassinolide (tính theo %, g/kg hoặc g/l ở 20 ^oC ± 2 ^oC) trong các dạng sản phẩm phải được công bố và phù hợp với mức sai lệch cho phép của hàm lượng hoạt chất được quy định trong Bảng 1.

Bảng 1 – Hàm lượng  brassinolide trong các dạng thành phẩm

Hàm lượng hoạt chất công bố (ở 20 oC ± 2 oC)		Mức sai lệch cho phép
%	g/kg (g/l)
Đến 2,5	Đến 25	± 15 % của hàm lượng công bố đối với dạng đồng nhất (EC , SC ,SL ….) ± 25 % của hàm lượng công bố đối với dạng không đồng nhất (WP,W G…)
Từ trên 2,5 đến 10	Từ trên 25 đến 100	± 10 % của hàm lượng công bố
Từ trên 10 đến 25	Từ trên 100 đến 250	± 6 % của hàm lượng công bố
Từ trên 25 đến 50	Từ trên 250 đến 500	± 5 % của hàm lượng công bố
Lớn hơn 50	–	± 2,5 %
–	Lớn hơn 500	± 25 g/kg

3.2    Yêu cầu về tính chất lý - hoá

Theo TCCS 135:2014/BVTV thuốc bảo vệ thực vật – Yêu cầu kỹ thuật

4   Phương pháp thử

4.1   Lấy mẫu

Lấy mẫu theo Phụ lục A của TCVN 8143 : 2009.

4.2   Xác định hàm lượng hoạt chất

4.2.1  Nguyên tắc

Hàm lượng brassinolide được xác định bằng phương pháp sắc ký lỏng cao áp với detector tử ngoại (UV), cột pha đảo. Kết quả được tính toán dựa trên sự so sánh giữa số đo diện tích hoặc chiều cao pic mẫu thử với số đo diện tích hoặc chiều cao pic mẫu chuẩn.

4.2.2  Thuốc thử

Chỉ sử dụng các thuốc thử tinh khiết phân tích, nước ít nhất đạt loại 3 của TCVN 4851 (ISO 3696) trừ khi có quy định khác.

4.2.2.1   Chất chuẩn brassinolide, đã biết hàm lượng.

4.2.2.2   Methanol , dùng cho sắc ký lỏng

4.2.2.3   Acetonitrile , dùng cho sắc ký lỏng

4.2.2.4   Axit phenylboronidc C₆H₇BO₂  ≥ 97%

4.2.2.5   Dung dịch axit phenylboronic , 10 mg/ml

Dùng cân phân tích (4.2.3.4) cân 1  g axit phenylboronic (4.2.2.4), chính xác đến 0,0001 g vào bình định mức 100 ml (4.2.3.1) , hòa tan và định mức tới vạch bằng methanol ( 4.2.2.2).

4.2.2.6   Dung dịch chuẩn làm việc 

Dùng cân phân tích (4.2.3.4) cân 0,01 g chất chuẩn brassinolide (4.2.2.1), chính xác đến 0,00001 g vào bình định mức 10 ml (4.2.3.1) hòa tan và định mức đến vạch  bằng methanol ( 4.2.2.2 ) được dung dịch A.

Dùng pipet 1 ml (4.2.3.2) hút chính xác 1 ml dung dịch A vào bình định mức 10 ml ( 4.2.3.1 ) thêm 1 ml dung dịch axit phenylboronic  ( 4.2.2.5 ) định mức tới vạch bằng methanol ( 4.2.2.2 ),  siêu âm trong bể ổn nhiệt ở 80^oC trong một giờ , đuổi khí trước khi bơm vào máy.

CHÚ THÍCH: Chất chuẩn bảo quản trong tủ lạnh phải được đưa về nhiệt độ phòng trước khi cân.

4.2.3   Dụng cụ, thiết bị

Sử dụng các thiết bị, dụng cụ của phòng thử nghiệm thông thường và cụ thể như sau:

4.2.3.1   Bình định mức, dung tích 10, 20; 50; 100 ml.

4.2.3.2   Pipet, dung tích 1; 2; 10 ml.

4.2.3.3   Xyranh bơm mẫu, dung tích 10 ml, chia vạch đến 1 ml 

4.2.3.4   Cân phân tích ( * ) , có thể cân chính xác đến 0,0001 g.

4.2.3.5   Màng lọc, có kích thước lỗ 0,45 µm.

4.2.3.6   Máy lắc siêu âm.

4.2.3.7  Đĩa bay hơi

4.2.3.8  Tủ sấy chân không

4.2.3.9  Thiết bị sắc ký lỏng, được trang bị như sau:

–  detector tử ngoại (UV) ;

–  cột sắc ký lỏng Lichrospher RP18 , có chiều dài 250mm , đường kính 4,0 mm , kích thước hạt 5μm hoặc loại tương đương ;

–  bộ bơm mẫu tự động hoặc bơm mẫu bằng tay;

–  máy vi tính hoặc máy tích phân.

GHI CHÚ: (*) Nếu sử dụng cân có độ chính xác đến 0,00001 g thì có thể cân các mẫu chuẩn và mẫu thử đến 0,01 g

4.2.4   Cách tiến hành

4.2.4.1   Chuẩn bị mẫu thử nghiệm

Mẫu cần được làm đồng nhất trước khi cân: đối với mẫu dạng lỏng phải lắc đều, nếu bị đông đặc do nhiệt độ thấp cần được làm tan chảy ở nhiệt độ thích hợp; đối với mẫu dạng bột, hạt phải được trộn đều.

4.2.4.2   Chuẩn bị dung dịch mẫu thử

Dùng cân phân tích (4.2.3.4) cân mẫu thử có chứa khoảng 0,01 g   hoạt chất brassinolide , chính xác đến 0,00001 g vào bình định mức 10 ml (4.2.3.1) hòa tan và định mức đến vạch  bằng methanol ( 4.2.2.2 ) được dung dịch B.

Dùng pipet 1 ml (4.2.3.2) hút chính xác 1 ml dung dịch B vào bình định mức 10 ml ( 4.2.3.1 ) thêm 1 ml dung dịch axit phenylboronic  ( 4.2.2.5 ) định mức tới vạch bằng methanol ( 4.2.2.2 ),  siêu âm trong bể ổn nhiệt ở 80^oC trong một giờ . Lọc dung dịch qua màng lọc 0,45 μm ( 4.2.3.5 ) trước khi bơm vào máy ( nếu cần ).

4.2.4.3   Điều kiện phân tích

-   Pha động    :                       ACN : H₂O = 60 :40 ( theo thể tích)

-   Bước sóng    :                     222 nm

-   Tốc độ dòng :                      1 ml/phút

-   Nhiệt độ cột  :                     40^oC

-   Thể tích bơm mẫu :            10 ml

4.2.4.4   Xác định

Dùng xyranh (4.2.3.3) bơm dung dịch mẫu chuẩn cho đến khi số đo diện tích của pic mẫu chuẩn thay đổi không lớn hơn 1 %. Sau đó, bơm lần lượt dung dịch chuẩn làm việc (4.2.2.6) và dung dịch mẫu thử (4.2.4.2), lặp lại 2 lần ( số đo diện tích của pic mẫu chuẩn thay đổi không lớn hơn 1 % so với giá trị ban đầu).

4.2.4.5  Tính kết quả

Hàm lượng hoạt chất brassinolide trong mẫu, X, biểu thị bằng phần trăm khối lượng (%) được tính theo công thức:

                                                               S_m  x  m_c

X(%) =   ¾¾¾¾¾¾  x  P

                                                                    S_c  x   m_m

                trong đó:

S_m      là giá trị trung bình của  số đo diện tích của pic mẫu thử;

S_c       là giá trị trung bình của  số đo diện tích của pic mẫu chuẩn;

m_c       là khối lượng mẫu chuẩn, tính bằng gam (g);

m_m      là  khối lượng mẫu thử, tính bằng gam (g).

P        là độ tinh khiết của chất chuẩn, tính bằng phần trăm (%).

Phụ lục A

(Tham khảo)

Giới thiệu hoạt chất BRASSINOLIDE

A1 Công thức cấu tạo:           

                                               

A2 Tên hoạt chất:                   BRASSINOLIDE

A3 Tên hoá học (IUPAC):      (3aS,5S,6R,7aR,7bS,9aS,10R,12aS,12bS)-10-[(2S,3R,4R,5S)-3,4-Dihydroxy-5,6-dimethyl-2-heptanyl]-5,6-dihydroxy-7a,9a-dimethylhexadecahydro-3H-benzo[c]indeno[5,4-e]oxepin-3-one

A4 Công thức phân tử:           C₂₈H₄₈O₆

A5 Khối lượng phân tử:          480,7

A6 Độ hòa tan trong:             Tan tốt trong các dung môi hữu cơ như methanol…

                                               Ít tan trong nước

 

 

 

 

 

 

 

 

Thư mục tài liệu tham khảo

[1]       Danh mục thuốc bảo vệ thực vật được phép sử dụng tại Việt nam, 2014

[2]        CDS Tomlin, The Pesticide Manual, Thirteeth Edition, 2003

Occurrence of Brassinolide and Castasterone in Crown Gall Cells of Catharanthus roseus

 Viện năng suất chất lượng Deming - 28 An Xuân, Thanh Khê, Đà Nẵng - 090 552 7089_Mr.Chiến

• Thử nghiệm hóa 
• Thử nghiệm vi sinh
• Thử nghiệm cơ lý